除草剂药效的发挥受到多种因素的影响，在应用过程中需全方位考虑。
1.温度
气温高有利于除草剂被杂草吸收，作用效果好。但不是气温越高越好，气温过高，喷出的雾状液很快被蒸发，特别对一些易挥发的除草剂及见光分解的除草剂，会降低除草效果，如2.4—D、氟乐灵、禾大壮、二甲四氯等，还会因挥发飘移到周围敏感作物上产生药害。气温过低时使用扑草净，植物对其不能及时降解，容易发生药害。正确的施药时应为：高温季节，晴而无风的上午11点前及下午4点以后；低温季节宜在上午10点至下午3点之间。
2.空气湿度
一般来说，湿度大有利于除草剂被杂草吸收，作用效果好。最好的时机是，叶面无露水、无雨水，而且空气湿度在60％以上。干热季节如过于干旱，则不要施药。
3.土壤水分
土壤水分充足，作物和杂草生长旺盛，有利于作物对药剂的分解和杂草对药剂的吸收并在体内传导运输，从而达到最佳除草效果，尤其是土壤处理剂必须有土壤湿润条件才能发挥良好的药效。如土壤干旱，作物和杂草生长缓慢，作物耐性差，并有利于杂草茎叶形成较厚的角质层，影响对除草剂的吸收传导，从而使除草剂药效下降。同时杂草为了适应干旱环境，大部分毛孔关闭，影响药剂的吸收，根系更加发达，增加防除难度。因此，干旱的天气，推荐高限量，同时施药时要加大喷水量。
4.降水
施药后不久即降雨，药液容易被冲刷，影响药效。
5.光照
百草枯、除草醚、伴地农等都是光活化性除草剂，在光的作用下才起杀草作用。西玛津、敌草隆、扑草净等光合作用抑制剂，也需在有光的情况下才能抑制杂草光合作用，发挥除草效果。氟乐灵等施于土表易挥发，见光易分解，使用时需及时与表层土混拌。
6.土壤pH值
当pH值在5.5—7.5时大部分除草剂能较好地发挥作用，过酸过碱的土壤对某些除草剂会起到分解作用，从而影响药效，如土壤封闭除草剂为酸性，在盐碱地中封闭除草效果差甚至无效果。又如绿磺隆在酸性土壤中降解速度快，影响药效，在碱性土壤中降解速度慢，对后茬敏感作物易造成药害。
7.土壤质地和有机质含量
质地疏松和有机质含量低的土壤吸附量少，过量则易淋溶造成对作物根部的伤害。粘性土和有机质含量高的土壤吸附能力强，使药液不能在土壤溶液中移动而形成均匀的药土层，从而出现“封不住”的现象，影响效果，因而应适当增加用药量，或采用推荐用量上限。有机质过高的高水肥田，一般不使用土壤处理的除草剂。
8.水质
指施药时所兑水的硬度和酸碱度。硬度指100毫升水中所含Ca2+、Mg2+离子的多少。由于某些除草剂的有效成份容易同这两种离子络合生成盐而被固定，所以硬度大的水质可能会使除草剂药效下降。具有酸碱性的农药掺入了碱性较高或酸性较高的水，会影响药剂的稳定性，从而降低除草效果。
9风速
除草剂要在无风或微风时施用，风大喷除草剂容易发生雾滴飘移，危害周围敏感作物。尤其是易挥发的除草剂，使用时应特别注意。
10.草龄
杂草在2-3叶期为最佳防治期。杂草草龄过大，抗性增大，用药量必须适量加大。
